NGS (Chromosomen-Screening)

Die genetische und chromosomale Untersuchung von Embryonen vor dem Einsetzen in die Gebärmutter wird als PID bezeichnet. Die Biopsie zur Untersuchung kann in 3 verschiedenen Stadien der Embryonalentwicklung durchgeführt werden. Ein gesunder Embryo kann nach genetischer Analyse des Polkörpers aus der Eizelle, des Blastomers aus dem Spaltungsembryo oder der Trophectodermzellen aus Blastozysten, die den fünften Tag als bevorzugt erreicht haben, auf die Mutter übertragen werden.

Besonders im fortgeschrittenen Alter der Mutter (38 Jahre und älter) entwickelt sich die Schwangerschaft nicht aufgrund von Chromosomenanomalien, oder die Schwangerschaft kann mit einer Fehlgeburt enden. Darüber hinaus können pränatale Diagnosemethoden verwendet werden, um zu bestimmen, ob eine Schwangerschaft bei Paaren mit hohem Risiko, eine genetisch bedingte Krankheit auf ihre Kinder zu übertragen, gesund ist. Leider müssen viele Paare die psychische, physische und finanzielle Belastung des Schwangerschaftsabbruchs mehrmals tragen, bis sie gesunde Kinder bekommen. Aus Kostengründen ist ein gesundes Kind mit PID vorteilhafter als ein krankes Kind, wenn sowohl Aneuploidie (Chromosomenstörung) als auch Einzelgenerkrankungen untersucht werden.

Next Generation Sequencing (NGS) 

 Die für PGT oder Array-CGH verwendete Microarray-Technologie kann alle Chromosomen in den Embryonen untersuchen, indem sie an ungefähr 4000 genetische Marker bindet, die über das gesamte Genom verteilt sind. Es kann es jedoch indirekt erkennen, indem es mit zwei bekannten DNAs verglichen wird, die normal sind. Bei der Sequenzierungstechnik der nächsten Generation (NGS) wird die DNA-Amplifikation (DNA-Amplifikation) in jeder Probe enzymatisch in Millionen Teile zerlegt. Nach mehreren Schritten werden die Sequenzen dieser DNA-Fragmente abgelesen und die Gesamtzahl der Ablesungen pro Embryo bestimmt. Die NGS-Methode ist vorteilhafter, da sie eine empfindlichere und genauere Untersuchung als die CGH-Methode bietet und Mosaismen in Embryonen von nur 20% erkennen kann.

Embryonen, die zwei oder mehr Zellpopulationen mit unterschiedlicher Chromosomenstruktur enthalten, werden Mosaikembryonen genannt. Es ist bekannt, dass Mosaikembryonen mit verringerten Implantations- und Schwangerschaftsraten, erhöhten genetischen Anomalien und ungünstigen Schwangerschaftsergebnissen verbunden sind. Die Fähigkeit der aCGH-Technologie, Mosaizität mit einer Rate von nur 50% zu erkennen, wird als Nachteil gegenüber der NGS-Technologie angesehen, und es ist möglich, Paaren mit der berichteten Mosaizitätsrate, die empfindlich auf NGS reagiert, genauere und realistischere Informationen über ihre Schwangerschaftschancen zu liefern .

Comprehensive Chromosomal Screening (CCS)

Mit CCS kann der gesündeste Embryo gefunden werden. Gleichzeitig müssen Sie keine große Anzahl von Embryonen transferieren, um die Wahrscheinlichkeit einer Schwangerschaft zu erhöhen und so das Risiko einer Mehrlingsschwangerschaft auszuschließen. Es erhöht auch die Wahrscheinlichkeit einer erfolgreichen Implantation und verhindert unnötigen Embryotransfer. Durch das Verständnis des Embryos, der die Gebärmutter der Mutter nicht festhalten kann, wird die Übertragung dieses Embryos verhindert, unnötige Behandlungen werden verhindert und die Erwartung der werdenden Mutter darf keine psychischen Probleme verursachen. Zum anderen wird das Risiko einer Fehlgeburt deutlich reduziert.

Array-vergleichende genomische Hybridisierung (a-CGH) 

Die vergleichende genomische Hybridisierung (CGH), die eine Alternative zur FISH-Methode darstellt, bei der eine begrenzte Anzahl von Chromosomen untersucht wird, hat es ermöglicht, alle Chromosomen in Embryonen zu untersuchen. Ein wesentlicher Nachteil der Technik ist jedoch, dass der Prozess langwierig ist. Aus diesem Grund werden Embryonen nach der Biopsie durch Verglasung eingefroren und gelagert. Da die Verglasung ein erfolgreiches Gefrier-Auftau-Verfahren ist und mit der zunehmenden Erfahrung des Labors alle möglichen Verfahren erfolgreich durchgeführt werden können, insbesondere an den Blastozysten des 5. und 6. Tages.

Was ist FISH (Fluoreszenz-In-Situ-Hybridisierung)?

 In der Vergangenheit wurde die FISH-Technik in großem Umfang zur Bestimmung von Aneuploidie (numerische Chromosomenstörungen) und Translokationen (strukturelle Chromosomenstörungen) eingesetzt.  Als Ergebnis der Biopsie werden Fluoreszenzsonden an Chromosomen von Embryozellen angebracht, und die von diesen Zellen erhaltenen Signale werden mit einem Mikroskop untersucht und es werden Informationen über die Chromosomenzahlen erhalten. Panels, bestehend aus 8,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22, X- und Y-Chromosomen und basierend auf der Erkennung der häufigsten Chromosomenanomalien bei spontanen Abtreibungen, werden bei diesem Panel verwendet. Die Mehrzahl der chromosomalen Anomalien, die bei Embryonen auftreten und Schwangerschaftsfehlgeburten verursachen können, konnte nachgewiesen werden. Der Nachteil ist die begrenzte Anzahl von Chromosomen, die mit dieser Methode untersucht werden können. Darüber hinaus ist die mögliche Fehldiagnose von Chromosomensignalen bei der FISH-Methode ein weiterer Nachteil dieser Methode. Daher wird dieses Verfahren derzeit nur bei Translokationsträgerpaaren verwendet, wenn Sequenzierung der nächsten Generation, NGS- oder Array-Verfahren nicht geeignet sind.