Procjena embriona (ocjenjivanje embrija) Kako se vrši?

KAKO SE VRŠI PROCJENJIVANJE EMBRIONA (OCJENJIVANJE EMBRIJA)?

U IVF tretmanima embriolozi svakodnevno klasificiraju prema određenim kriterijima, od sakupljanja oocita počevši od 0.tog dana do 6.-tog dana razvoja embriona. Glavni je cilj ovdje postići embrion s najvećim potencijalom rasta, što se smatra najvećom šansom za trudnoću.

KAKO SE VRŠI OCJENA 0.–tog DANA?
Danom sakupljanja oocita (jajašca) smatra se dan 0. Radnje tog dana mogu se navesti na sljedeći način:
Oociti se prikupljaju i odmaraju u laboratoriji 3 sata u posebnim uređajima. Pročišćava se iz okolnih ćelija i klasificira prema njihovoj zrelosti denutacijom.

KOJI SE OOCITI MOGU MIKROINJICIRATI?

Za oplodnju jajne ćelije moraju biti zrele MII (metafaza II oocita), to jest da je mejotska podjela dostigla 2. fazu.

KAKO ODREDITI ZRELOST OOCITA?

GV (germinal vezikule) oociti: Ovi oociti su nezrele jajne ćelije koje još nisu započele dijeliti mejozu. Ove ćelije se ne mogu oploditi.
MI (Metafaza I) oociti: To su nezreli oociti koji su pauzirali u prvoj fazi mejoze. Ako nisu dovoljno zreli, mogu se sazreti i oploditi čekanjem 4 sata pod odgovarajućim uvjetima.
MII (Metafaza II) oociti:U II fazi dijeljenaj mejoze zreli oociti spremni su za oplodnju.

                      GV OOSİT                              MI OOSİT                                MII OOSİT

KAKO ODREDITI DA SU OOCITI DOBROG, SREDNJEG ILI LOŠEG KVALITETA?

OOCITI DOBROG KVALITETA :

• Prozirna citoplazma i normalnog je oblika
• Jedno i jednolično polarno tijelo (polarno tijelo)
• Prozirni i normalne debljine vanjski sloj (zona pellucida)

SREDNJI KVALITET OOCITA:

• blago granulirana citoplazma i / ili degradiranog oblika
• Stigma pola u fragmentiranoj i nenormalnoj morfologiji
• Vanjski sloj blago pigmentiran
• Citoplazmatska tijela
• Raspadi u području perivitelina (između membrana oocita i vanjskog sloja)

OOCITI SLABOG KVALITETA

Tamna / zrnasta / deformirana citoplazma
Polarno tijelo u fragmentiranoj i nenormalnoj morfologiji
Pigmentirane / debele šindre
vakuole
Perivitellin raspadi

KAKO SE VRŠI KONTROLA 1. DAN FERTILIZACIJE (FERTILIZACIJA)?

U 16-22 satu nakon oplodjavanja. može se vidjeti vršenja oplodnje. Oplodnja je u osnovi spajanje jezgre iz sperme i jezgre iz oocita. Za normalnu oplodnju potrebno je vidjeti prisustvo dva pronukleusa i dva polarna tijela koja dolaze od ženskog i muškog pola. Prisutnost pronukleusa ili prisustvo više od dva pronukleusa naziva se abnormalna oplodnja.
Kriterijumi za evaluaciju u ovoj fazi razvoja:
Broj, veličina i položaj pronukleusa
Broj, distribucija i dimenzije nukleolusa prekursora (NPB)
Broj polarnih tijela

Normalno oplođena oocita (2PN i 2 polovije tijela)

KAKO SE VRŠI PROCJENA EMBRIJONA DOSTAVA 2. i 3. dana?

Drugog dana razvoja otprilike u 22-25.-om satu jednoćelijski zigot podijeljena je u dvije faze.
U 42-44.-tom satu embrion se pretvara se u četveroćelijski embrion.
Trećeg dana, embrion se nastavlja dijeliti.
U 66-68.mom satu dostiže 6 - 8 ćelijsku fazu.
Embrione klasifikujemo prema nekim kriterijima u ovom periodu, koji nazivamo stadijom rane diobe.

Embrion dobrog kvaliteta: ćelije jednake veličine s prozirnom citoplazmom
Embrion srednje kvalitete: sa citoplazmatskim nepravilnostima i / ili veličinama ćelija neznatno se razlikuju jedna od druge
Embrion lošeg kvaliteta: veličine ćelija značajno se razlikuju jedna od druge i / ili sa zrnastom ili tamnom citoplazmom

Kako se ćelije dijele, neki ostaci citoplazme mogu se akumulirati u ćeliji. Stopa i položaj tih struktura, koje nazivamo fragmentacija, u embrionu važni su za procjenu kvalitete embriona.

• Embrion 1. kvaliteta: nema fragmentacije
• Embrion 2. kvaliteta:% <10> <! - 10 -> <! - 10 -> <! - 10 ->
• Embrion 3. kvaliteta: -35 fragmentacija
• Embrion četvrtog kvaliteta:> 35% fragmentacija

Smanjenje kvaliteta embriona u ranoj fazi u odnosu na navedene parametre uzrokuje zaustavljanje razvoja napredne faze ili se razvoj nastavlja slabo.

2. dan embrion 1. kvaliteta (4-ćelijski)     3. dan embrion 1. kvaliteta (8 ćelijski)

2. dan embrion 3. kvaliteta                       3. dan embrioni 2. i 3. kvaliteta

IV. KAKO OCJENJUJE EMBRIO?

96. sata nakon oplodnje embrion postaje višećelijska ćelija sa 16-20 ćelija, granice ćelija sada su kompaktna struktura koja je počela da nestaje.

4. dan embrion drugog kvaliteta (Morula)       Embrion 1. kvaliteta koji pokazuje dijeljenje 4. dana

KAKO OCENJUJE EMBRION V / VI DANA?

Embrion koji je dostigao nivo od 5 i 6 dana u fazi je koju nazivamo blastocistom s dva diferencirana ćelijska sloja koja sadrže u prosjeku 100 ćelija. Unutarnja ćelijska masa (ICM) u ova dva različita ćelijska sloja dio je bebe. Vanjska ćelijska masa (trofektoderma) proizvodi placentu. Kvaliteta embriona u ovoj fazi određena je karakteristikama unutarnje i vanjske ćelijske mase i ekspanzijom embrija. U skladu s tim, blastociste su klasificirane na sljedeći način:

PREMA EKSPANZIJI UNUTRAŠNJE ŠUPLJINE EMBRIJA (BLASTOSOL):

SCORE 1: Iniciranje cijepanja u embrionu. Blastosol (unutrašnja šupljina) je manji od polovine zapremine ćelije
SCORE 2: Blastosol ima više od polovine zapremine ćelije
BROJ 3: Volumen Blastosola prekrio je volumen embrija
BROJ 4: Volumen Blastosola je veći od volumena embriona, a vanjska membrana je tanja
SCORE 5: Vanjska membrana se lomi i zametak počinje cvjetati
BROJ 6: Embrion je potpuno odvojen od vanjske membrane

KLASIFIKACIJA S UNUTARNjOM MASOM CELL (ICM):

A: Sadrže veliki broj čvrsto zatvorenih ćelija
B: Lako upakovan, ali sadrži mnogo ćelija
O: Labav i sadrži vrlo malo ćelija

KLASIFIKACIJA VANJSKOM ĆELIČNOM MASOM (TROFECTODERM):

A: Sadrži veliki broj uredno složenih, gusto povezanih ćelija
B: Sadrži mali broj slabo vezanih ćelija
C: Nepravilno sortirani koji sadrže slabo vezane velike ćelije

5.dan embrion 5AA                                             6.dan embrion 6AA